中文会议： 中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会论文集

会议日期： 2004-09-01

会议地点： 贵阳

主办单位： 中国畜牧兽医学会

作　　者： ; ; ; ; ;

机构地区： 华中农业大学畜牧兽医学院

出　　处： 《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》

摘　　要： 以禽流感分离株A/chicken/Hubei/326/2002病毒RNA为模板,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增了NP基因的cDNA,全长1580bp,将此扩增产物克隆进pMD18-T载体,进行了重组质粒的酶切鉴定.氨基酸序列分析表明,与GenBank中收录的AIV其它病毒株NP全基因的同源性在92﹪以上.进一步克隆NP基因主要抗原表位区(1000bp),构建原核表达质粒pET-NP',经IPTG诱导,在E.coli BL21(DE3)中获得表达,SDS-PAGE显示,表达的蛋白分子量为 34kD,并形成包涵体.Western印迹分析表明,表达蛋白能与AIV标准阳性血清发生特异性反应,证明NP基因获得了表达,表达蛋白具有生物学活性.

关 键 词： 禽流感 基因 克隆 表达 逆转录聚合酶链反应 血清学

领　　域： [农业科学]