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胸膜肺炎放线杆菌4型菌毛亚单位基因apfA特异性片段的克隆和表达

中文会议: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集

会议日期: 2005-05-01

会议地点: 济南

主办单位: 中国畜牧兽医学会

作  者: ; ; ; ; ; ; ;

机构地区: 沈阳农业大学畜牧兽医学院

出  处: 《中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会》

摘  要: 以猪胸膜肺炎放线杆菌血清型7型国内分离株25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apfA特异性基因片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18-T进行连接、转化,经过酶切及序列分析鉴定后,亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组表达质粒pGEX-apfA,转化到大肠杆菌感受态DE3中,以IPTG进行诱导,进行SDS-PAGE电泳.结果表明,25-4株apfA基因与基因库中标准7型apfA基因同源性达到98%,所表达的融合蛋白相对分子量约为42KDa,与预测相符.apfA特异性基因片段的成功克隆和表达为猪胸膜肺炎放线杆菌病的致病机理的研究及新型疫苗的研制工作打下了基础。

关 键 词: 猪胸膜肺炎 放线杆菌 型菌毛 基因 基因克隆 基因表达

领  域: [农业科学]

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