中文会议： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集

会议日期： 2005-05-01

会议地点： 济南

主办单位： 中国畜牧兽医学会

作　　者： ; ; ; ; ; ; ;

机构地区： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

出　　处： 《中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会》

摘　　要： 应用PCR方法从牛分枝杆菌vallee株基因组中扩增获得MPB70、MPB83和ESAT-6三个目的基因片段,利用基因搭桥和连接技术,将三基因串连于同一表达载体pET32(a)中,每个基因之间以连接肽相隔.利用大肠杆菌表达系统,获得了可溶性表达的MPB70、MPB83和ESAT-6三价融合蛋白,分子量大小约66Kda,与预计大小相符.Westernblot和ELISA方法分析重组蛋白的免疫学活性,结果显示该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清和人结核病的阳性血清发生特异性反应,而与副结核阳性血清不反应.该纯化蛋白的成功表达及初步应用为牛结核病的诊断及融合蛋白功能的研究奠定基础。

关 键 词： 牛分枝杆菌 融合基因 原核表达 免疫学活性 方法

领　　域： [农业科学]