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禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达

中文会议: 中国畜牧兽医学会禽病学分会禽流感及免疫抑制病论坛论文集

会议日期: 2005-10-01

会议地点: 大连

主办单位: 中国畜牧兽医学会

作  者: ; ; ; ; ; ;

机构地区: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

出  处: 《中国畜牧兽医学会禽病学分会禽流感及免疫抑制病论坛》

摘  要: 本文经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/PFV/Restock/1/34(H7N1)1.7kbHA基因的eDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序.在去除编码HA信号肽的核苷酸序列后,亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHis,筛选到重组转移载体命名为pBHisH7HA,测序正确后与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTMDNA)共转染Sf9昆虫细胞,挑取蓝色蚀斑,经三轮蚀斑纯化,获得数株重组杆状病毒rpBlueHisH7HA.提取重组病毒DNA经PCR证明目的基因片段已插入到杆状病毒基因组中,血凝实验,SDS-PAGE和Western-blot实验结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得了表达.

关 键 词: 禽流感病毒 血凝素基因 重组杆状病毒

分 类 号: [S]

领  域: [农业科学]

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