中文会议： 中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术研讨会论文集

会议日期： 2006-11-24

会议地点： 广州

主办单位： 中国微生物学会

作　　者： ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;

机构地区： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

出　　处： 《中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会》

摘　　要： 以牛分支杆菌vallee株基因组DNA为模板,应用PCR法扩增hsp65和esat6两个基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)获得融合基因hsp65-esat6,将hsp65-esat6连接到原核表达载体pET32a(+)上,构建原核重组表达质粒pET65-E6,将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,以IPTG进行诱导(终浓度1mmol/L),进行SDS-PAGE电泳分析,结果表明:Hsp65-ESAT6融合蛋白是以包涵体形式表达,融合蛋白pET65-E6裂解为两部分,即58KD和30KD,两个蛋白分子量相加与预测的88KD相符,将表达的融合蛋白经Ni2+亲和层析的方法纯化.

关 键 词： 牛分之杆菌 纯化 法 基因片段 基因片段 融合蛋白

分 类 号： [S8]

领　　域： [农业科学]