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猪流感病毒间接ELISA检测方法的建立与运用

中文会议: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

会议日期: 2007-09-20

会议地点: 江西井冈山

主办单位: 中国畜牧兽医学会

作  者: ; ; ; ; ;

机构地区: 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室

出  处: 《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会》

摘  要: 根据本室2004年分离的H1N1亚型猪SIV血凝素基因序列设计并合成特异性引物,以该病毒为模板扩增缺失信号肽和跨膜区的血凝素基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a中.在大肠杆菌中获得高效。通过Wesern Blot实验证明该表达产物具有免疫学活性,蛋白分子量约为55ku.利用亲和层析原理纯化蛋白作为包被抗原建立了检测H1亚型SIV抗体的间接ELISA方法。该ELISA方法具有较高的特异性和敏感性,重复性好。应用该方法对2006年5~12月共计2029份临床猪血清进行检测,结果显示各个地区存在不同程度的SIV感染,平均阳性率为23.46%。在6月、7月和12月分别出现抗体水平高峰,分别高达25.35%、24.92%和51.42%。

关 键 词: 猪流感病毒 间接 血清学调查 抗体检测

领  域: [农业科学]

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