中文会议： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集

会议日期： 2008-07-01

会议地点： 北京

主办单位： 中国畜牧兽医学会

作　　者： ; ; ; ; ; ; ;

机构地区： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

出　　处： 《中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会》

摘　　要： 利用RT-PCR方法扩增猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)HA基因，克隆于PMD18-T载体进行测序。以PMD18-HA为模板、利用带酶切位点的引物再次扩增HA基因的开放阅读框(ORF)，克隆到表达载体pET32a中，经双酶切、测序及PCR鉴定得到阳性重组表达质粒pET-HA，将质粒转化到表达宿主菌BL21(DE3)中，经终浓度为1mM的IPTG诱导，SDS-PAGE结果显示，HA蛋白获得了高效表达，经Western blot检测证实表达产物具有良好的免疫学活性，经间接ELISA预试验表明具有良好的抗原反应性。本研究为以重组HA蛋白为抗原建立H1亚型猪流感抗体的ELISA检测方法奠定了基础。

关 键 词： 猪流感病毒 基因 原核表达 方法

领　　域： [农业科学]