中文会议： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集

会议日期： 2008-07-01

会议地点： 北京

主办单位： 中国畜牧兽医学会

作　　者： ; ; ; ; ; ; ;

机构地区： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室

出　　处： 《中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会》

摘　　要： 结合单链标记和基因芯片两种技术，构建可同时区分AIV的H5、H7、H9血凝素亚型及N1、N2神经氨酸酶亚型的基因芯片。分别T\A克隆部分禽流感病毒的M基因，H5、H7、H9亚型HA基因，N1、N2亚型NA基因，并构建重组质粒。以重组质粒为模板，用PCR方法扩增制备探针，纯化后点于氨基修饰的片子上，制备基因芯片；常规方法从待检样品中提取RNA，用Cy3标记下游引物进行RT-PCR，将荧光素引入PCR产物的反义链中；与芯片杂交，检测AIV主要亚型。结果显示检测探针可特异性的与相应的标记样品进行杂交，呈现较强的杂交信号；该方法可以准确鉴别诊断禽流感主要流行亚型，对感染样品和现地样品检测结果与RT-PCR、鸡胚接种有较高一致性，符合率为100％和96％。研究表明该方法可用于同步鉴别部分主要流行的禽流感亚型，是一种有效的新方法。

关 键 词： 单链标记 基因芯片 禽流感亚型 血凝素亚型 流感病毒 重组质粒 方法

分 类 号： [S]

领　　域： [农业科学]