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实时荧光定量PCR技术快速定量检测H3N2亚型猪流感病毒

中文会议: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集

会议日期: 2008-07-01

会议地点: 北京

主办单位: 中国畜牧兽医学会

作  者: ; ; ; ; ; ; ; ;

机构地区: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

出  处: 《中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会》

摘  要: 选取H3N2亚型猪流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)基因保守序列,使用Primer Express 2.0软件设计出特异性引物和TaqMan MGB探针,利用实时荧光定量PCR技术来检测猪流感病毒。使用含有选定检测序列的重组质粒pMD-H3、pMD-N2标准品做标准曲线,结果表明该方法的灵敏度为100拷贝/反应,标准曲线的相关系数分别为0.99015(H3)、0.99947(N2),除猪流感病毒H3N2亚型外,猪流感病毒H1N1亚型、H9亚型与其他5种猪病病毒检测均为阴性,样品检测与病毒滴定及病毒分离结果的符合率均为100%,该方法特异性好、重复性佳,为H3N2亚型猪流感病毒检测提供了一种特异、敏感、快速的定量检测方法。

关 键 词: 猪流感病毒 探针 技术 病毒检测

领  域: [农业科学]

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