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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JX143株感染性克隆的构建

中文会议: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集

会议日期: 2008-09-01

会议地点: 大连

主办单位: 中国畜牧兽医学会

作  者: ; ; ; ; ;

机构地区: 中国农业科学院上海兽医研究所

出  处: 《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会》

摘  要: 目的: 确定"猪高热综合征"的主要病原是否为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),为探寻高致病性病毒基因组结构和功能,高致病性蓝耳病发病机理.以及进一步研制针对后者的基因工程疫苗奠定基础. 方法: 根据PRRSV基因组序列设计特异性引物,分五段扩增了高致病性PRRSV JX143株的全长cDNA,将各cDNA片段克隆到DBlueScript Ⅱ SK(+)载体中,进而利用重叠区中的单酶切位点将其连接成JX143株的全长cDNA克隆pJX143和含有遗传标记Mlu Ⅰ限制性内切酶的基因组全长cDNA克隆pJX143-M. 结果: 全长cDNA克隆经体外合成RNA后转染MA-104细胞,均获得稳定的拯救病毒.通过比较亲本毒与拯救病毒的病毒滴度,多步生长曲线和利用拯救病毒vJX143进行动物回归试验,结果发现病毒学及生物学特性没有显著差异. 结论: PRRSV的JX143株病毒确实是引起"猪高热综合征"的主要病原;建立了首个高致病性PRRSV的感染性cDNA克隆,证明拯救病毒与亲本病毒生物学特性相同.

关 键 词: 猪繁殖与呼吸综合征 感染性克隆 猪蓝耳病 猪高热综合征

分 类 号: [S]

领  域: [农业科学]

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