中文会议: 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会论文集
会议日期: 2009-09-01
会议地点: 南宁
主办单位: 中国畜牧兽医学会
机构地区: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
出 处: 《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会》
摘 要: 以含有猪流感病毒A/Swine/Guangdong/9/2005(H3N2)NP基因的重组质粒pMD18-NP为模板,利用带特定酶切位点的引物PCR扩增NP基因,将其亚克隆质粒pIRES2-EGFP中,再次将含有NP及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315,构建重组穿梭质粒pDC315-NP-EGFP。利用脂质体转染方法将穿梭质粒pDC315-NP-EGFP和腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,E3Cre共转染HEK293细胞,基于腺病毒感染后形成的典型细胞病变及EGFP基因在细胞中的表达筛选到重组腺病毒rAd-NP-EGFP。经PCR和Westem-blot鉴定,结果表明NP基因已被重组到腺病毒的基因组中,并能够伴随病毒的复制而表达,表达蛋白具有良好的生物性活性。
分 类 号: [S8]
领 域: [农业科学]