导　　师： 叶恭银

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 浙江大学

摘　　要： 寄生蜂是农业害虫重要的天敌,在害虫生物防治中发挥重要作用。寄生蜂在产卵的同时,将毒液、多分DNA病毒(PDV)或类病毒颗粒(VLP)等寄生因子一同注入寄主体内,抑制寄主免疫反应或调控寄主生长发育以保护其子代能够成功完成发育。毒液等寄生因子可以用来开发新型免疫抑制剂或用于转基因作物的开发,具有广阔的应用前景。因此,寻找寄生蜂寄生因子,明确寄生因子的功能可以为下一步的开发利用奠定关键基础。目前,仅对少数几个寄生蜂毒液进行了研究,获得的毒液基因也很有限,功能的研究则更少。因此,本研究以菜粉蝶Pieris rapae的蛹期优势内寄生蜂蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum为研究对象,采用毒腺转录组和毒液蛋白质组的分析方法解析了蝶蛹金小蜂毒液蛋白的组分。同时选取四个毒液蛋白基因为重点,研究并明确了其基因序列、表达模式与生物学功能。 1.蝶蛹金小蜂毒液蛋白质组分析 首先测定了蝶蛹金小蜂雌蜂毒腺／非毒腺组织的转录组,对转录组数据进行了分析。在利用shotgun蛋白质组方法对蝶蛹金小蜂毒液进行分析的基础上,对获得的蛋白质组质谱信息与蝶蛹金小蜂毒腺／非毒腺组织转录组数据库和后生动物门蛋白质数据库作比对分析,鉴定明确了蝶蛹金小蜂毒液蛋白组分中的60个蛋白,其中可分为蛋白酶类、蛋白酶抑制剂、识别或结合蛋白、其他及功能未知蛋白5大类。 2.蝶蛹金小蜂毒液钙网蛋白的功能及其与寄主菜粉蝶钙网蛋白关系的分析 蝶蛹金小蜂毒液钙网蛋白氨基酸序列可分为N、P和C三个区域,并且对序列进行进一步分析首次发现在C末端有一个Coiled-coil结构域,原核表达并纯化蝶蛹金小蜂毒液钙网蛋白或缺失Coiled-coil结构域的突变体,制备了兔多克隆抗体。定量PCR检测到蝶蛹金小蜂毒液钙网蛋白基因在各个组织都有表达,在毒腺中表

关 键 词： 蝶蛹金小蜂 毒液 转录组 蛋白质组 钙网蛋白 丝氨酸蛋白酶抑制剂

领　　域： [农业科学] [农业科学] [生物学]