导　　师： 陈保善;王振中

学科专业： I0401

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 罗汉果是广西特有的多年生葫芦科植物，其果实是传统的中药和饮品，具有消肿止痛、清热解毒和止咳利喉等功效。罗汉果病毒病是罗汉果的主要病害，是制约罗汉果生产的主要因素之一。罗汉果病毒病的症状表现多样性，包括花叶、疱叶、卷叶、带状畸形、叶缘扭曲、明脉等；一般宿根苗的发病率为100％，健康组培苗种植后，在6-7月份也开始出现症状，结果期的病株率达60％以上。发病植株果实数量减少，果实变小，直接降低其经济价值。 采用马铃薯y病毒科的简并引物对表现症状的罗汉果叶片进行rt-pcr，得到0．7kb和1．6kb的2条带，其中0．7kb片段和番木瓜环斑病毒(papayaringspotvirus，prsv)有89％的同源性，1．6kb片段和小西葫芦黄化花叶病毒(zucchiniyellowmosaicvirus，zymv)有95％的同源性；根据已发表的wmv基因组序列设计简并引物进行rt-pcr，得到预期的0．56kb的片段，该片段和西瓜花叶病毒(watermelonmosaicvirus，wmv)有96％的同源性。此外，设计3种病毒的第二对简并引物进行rt-pcr，均能扩增出相应的病毒特异性片段。说明罗汉果病毒病叶中带有prsv、zymv和wmv，其中prsv和zymv为首次报道，分别命名为prsv罗汉果分离株(prsv-lhg)和zymv罗汉果分离株(zymv-lhg)。 经多次接种和rtopcr检测，发现在西葫芦上，prsv-lhg侵染产生典型的花叶症状及轻微的叶片畸形，zymv-lhg侵染产生黄化、花叶及明脉症状，后期严重畸形，产生带状叶；因此，可以通过在西葫芦上的症状表现，将该2种病毒分离。用peg沉淀技术分别提取prsv-lhg和zymv-lhg病毒粒子，电镜下观察发现，2种病毒均为弯曲线状。 人工接种时，在罗汉果上，prsv-lhg侵染产生轻花叶症状，zymv-lhg侵染产生黄化、花叶和畸形症状，2种病毒同时侵染罗汉果，并不表现明显的症状加重；当wmv与prsv-lhg、zymv-lhg共同侵染�

关 键 词： 罗汉果 基因组序列 病毒病 病原鉴定

领　　域： [农业科学] [农业科学] [农业科学] [农业科学] [农业科学]