导　　师： 严海燕

学科专业： G1001

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 中国科学院武汉植物园

摘　　要： 花生是一种重要的油料作物，对于花牛种子发育相关基因的研究，特别是对有关储藏物质积累过程调控机制的研究具有重要的生产实践意义。同时花生义是一种植物蛋白源，对花生贮藏蛋白基因结构以及表达调控的研究，为改善花生品质，培育优质花生品种以及生产低变应原花生提供理论基础。 本实验通过用一对特异性引物，pcr扩增得到花生(arachishypogaea)主要致敏蛋白arah1的基因的启动子片段1957bp，其序列组成与已发表序列基本一致。用其替换pbin35s-mgfp4载体中的35s启动子部分，组成一种花生转基因表达载体pga1。该载体含有种子特异表达调控元件、增强表达元件和一些与转录因子结合的调控元件，是一个强启动子。此载体便于将外源基因转入花生，实现外源基因在花生中的表达，为建立花生生物反应器奠定了基础。 本文还对花生贮藏蛋白基因在基因组dna纤维上的排布规律进行了初步探索。实验通过dna纤维荧光原位杂交技术(fiber-fish)，利用花生中两个贮藏蛋白基因(arah1和arah3)的启动子片断为探针，对花生基因组dna进行双色杂交。研究发现，花生贮藏蛋白基因有可能成簇分布在染色体的某个区域，连续的11个簇最长跨越了纤维上86.78μm的长度，对应的dna长为217.82kb，簇之间间隔的平均纤维长度为3.94±0.78μm，相当于dna长度在7.93kb-11.85kb之间。对多个双色杂交信号进行统计，发现每个簇的平均长度为5.7+1.32μm，对应的dna长度在10.99一17.62kb之间。

关 键 词： 花生 贮藏蛋白 启动子 表达载体 纤维荧光原位杂交

分 类 号： [S565.2]

领　　域： [农业科学]