导　　师： 李子义

学科专业： G1002

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 吉林大学

摘　　要： 在哺乳动物胚胎早期发育过程中，全基因组的甲基化会发生明显的变化。在小鼠胚胎受精之前，雌雄生殖细胞具有较高的甲基化水平，受精后父源基因组迅速的发生主动去甲基化，而母源基因组仍然保持甲基化状态。随着卵裂的进行，母源基因组发生被动的去甲基化，直到桑葚胚阶段达到最低水平。目前研究认为母源基因组被动的去甲基化主要是由于细胞内DNMT1的减少造成的，而参与父源基因组的主动去甲基化因子还不清楚。之前研究发现，小鼠TET家族的三种蛋白能够催化5甲基胞嘧啶（5mC）到5羟甲基胞嘧啶（5hmC）的转化，因此，5hmC是否参与雄原核的主动去甲基化作用引起了人们的广泛关注。本研究通过分析5hmC在合子和早期植入前胚胎中的分布以及甲基化质粒在早期胚胎中的变化，得到如下结果：（1）在合子中，雌雄原核5mC和5hmC表现出不对称的分布，而在孤雌原核时期胚胎两个原核中5mC和5hmC染色信号一致，并没有观察到不对称的分布；（2）甲基化质粒在受精和孤雌胚胎中能够发生主动去甲基化，在注射后50h时能够观察到甲基化质粒的蛋白水平表达。在注射后的胚胎中绿色荧光的表达呈现出嵌合的表达模式，并且受精胚胎中绿色荧光蛋白阳性胚胎数明显高于孤雌胚胎。在甲基化质粒去甲基化过程中，质粒启动子区域内能够检测到5hmC的存在；（3）Tet3基因在MII期卵母细胞和合子时期表达量较高，随着胚胎的发育其表达量逐渐下降，Tet1和Tet2基因在合子时期和植入前胚胎中表达量较低。在植入前胚胎中，甲基化和去甲基化过程是共同存在的，并且是一个动态变化的过程，4细胞到8细胞发育过程中LINE1原件的总甲基化程度和5hmC含量发生明显的降低，但是囊胚阶段内细胞团中甲基化和羟甲基化程度出现升高的趋势。

关 键 词： 主动去甲基化 羟甲基胞嘧啶 基因 原核 小鼠

分 类 号： [Q75]

领　　域： [生物学]