导　　师： 艾志录

学科专业： H3201

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 河南农业大学

摘　　要： 苹果多酚是苹果的次生代谢产物,具有抗氧化、抗癌细胞增生、抗过敏、预防龋齿、消臭美白和抑制血压等多种生理功能。大孔树脂是具有大孔网状结构、吸附性能优良的高分子吸附分离材料,目前在天然产物分离和纯化方面已经有广泛的应用。将大孔树脂应用到苹果多酚的分离富集生产中,具有非常重要的意义。本实验以苹果渣为材料,以没食子酸为标准品,以FC—福林法为苹果多酚总酚含量的测定方法,通过静态吸附和解吸研究,筛选确定最适合苹果多酚分离富集的大孔吸附树脂;采用响应曲面法,研究树脂动态吸附解吸特性,并优化确定最佳动态吸附工艺条件:采用四种体外研究方法,考察苹果多酚制品的抗氧化活性:腹腔注射构建高铅小鼠动物模型,灌胃饲药探讨苹果多酚是否具有促进排铅功效:采用高效液相色谱法测定了苹果渣多酚的部分活性成分。试验结果表明:1、通过对大孔树脂静态吸附和解吸综合研究,所选的16种树脂中NKA—9大孔树脂吸附性能和解吸性能均表现良好,可以作为吸附分离苹果多酚的树脂材料;2、研究NKA—9大孔树脂吸附特性,绘制25℃时NKA—9树脂对苹果多酚的等温吸附线曲线,并与模型相拟合。NKA—9树脂等温吸附线与Langmuir模型等温线的拟合决定系数R²=0.9902,与Freundlich模型等温线的拟合决定系数R²=0.9563,说明NKA—9树脂的等温吸附线即符合Langmuir模型又符合Freundlich模型,与Langmuir模型符合度更高,属于单分子层优惠型吸附,并预测静态最大吸附量Q₀=63.69mg/g:3、研究NKA—9大孔树脂吸附特性,绘制25℃时NKA—9树脂对苹果多酚的吸附动力学曲线,并与模型相拟合。NKA—9树脂的吸附动力线与Langmuir单层吸附模型的拟合决定系数R²=0.9299,计算出NKA—9树脂对苹果多酚的平衡吸附常数,说明NKA—9树脂对苹果多酚的吸附属于慢性吸附;4、选择上样速率、料液浓度和pH值为动态吸附主要因素,采用响应曲面法优化NKA—9大孔树脂动态吸附工艺条件,建立回归方程:Y（动态吸附量）=19.19+0.74A+2.33B-1.70A²+0.74B²;确定最佳吸附工艺条件:上样速率为1.14ml/min,料液浓度2.50mg/ml,pH值4.47,树脂的最大理论动态吸附量为22.31mg/g;5、选择洗脱速率、洗脱剂浓度和洗脱剂用量为动态解吸附主要因素,采用响应曲面法优化NKA—9大孔树脂动态解吸附工艺条件,建立回归方程:Y（动态解吸附率）=86.15-7.85A+0.65B+0.58C-6.03A²-1.73B²-1.45C²-0.41AB-0.51AC+1.36BC;确定最佳解吸附工艺条件:洗脱速率0.79ml/min,洗脱剂浓60.18%,洗脱剂用量116.27ml,NKA—9树脂的最优理论动态解吸率为88.2057%:6、分离纯化所得的苹果多酚样品经HPLC分析,苹果多酚样品中已明确含有没食子酸、根皮苷和阿魏酸,其他成分不能确定,还需进一步研究。通过计算,苹果多酚中根皮素占35.5%,阿魏酸占8.9%,没食子酸占5.7%:7、分别采用格里斯试剂比色法、邻苯三酚自氧化法、Fenton法研究苹果渣中多酚物质的抗氧化活性。结果表明:在实验浓度范围内,多酚提取物对O^2-·、·OH和NO₂^-的清除率分别高达97.56%、95.65%和76.98%,说明苹果渣中多酚物质对自由基有较强的清除作用,具有的良好的抗氧化活性:8、采用Rancima法以新鲜轧制花生油的诱导时间（Induction Time）为指标,四种抗氧化剂都能有效地延长花生油的诱导时间,添加等浓度四种抗氧化剂的花生油其抗氧化稳定性顺序是AP＞TBHQ＞Vc＞BHT（p＜0.05）,说明四种抗氧化剂均表现出较好的氧化抑制活性,其中AP、TBHQ和Vc表现更好,诱导时间均超过20h,是空白油样诱导时间的2.5～3倍。AP与添加BHT相比也有较大提高,诱导时间分别延长了78.12%和23.12%,而且还略长于目前常用的抗氧化剂TBHQ;9、利用滤纸片法以抑菌圈直径为指标,考察了不同浓度的苹果多酚溶液对食品常见污染菌—大肠杆菌抑制作用。在0.1～0.5%的浓度范围内,苹果多酚溶液浓度均表现出很强的抑制作用,而且抑制作用与溶液浓度呈正相关关系;10、观察苹果多酚对铅染毒小鼠体内铅含量的影响,发现铅染毒后,染毒小鼠喂食不同浓度苹果多酚后,血铅、肝脏铅含量和股骨蓄积水平显著降低,而尿铅、粪铅水平显著增加。证明苹果多酚对铅有明显的拮抗作用,能够协助动物体排铅。

关 键 词： 苹果多酚 响应曲面 动态吸附 动态解吸 体外抗氧化 诱导时间 促排铅

分 类 号： [TQ914.1]

领　　域： [化学工程]