导　　师： 丁壮

学科专业： I0602

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 吉林大学

摘　　要： 本研究将本实验室分离、鉴定并纯化的NA-1株鹅源副粘病毒,进行了基因组RNA的提取,以GenBank收录的ZJ1株鹅源副粘病毒全基因组核苷酸序列设计8对特异性引物,通过RT-PCR方法分段扩增了基因组全部核苷酸序列,全长为15 192nt。为阐明鹅源副粘病毒基因组各基因片段来源、演化特点、基因组功能及造成禽副粘病毒种间传播的分子机制,对基因组序列进行分析,NA-1株鹅源副粘病毒全基因组序列与7株鸡源新城疫病毒株同源性仅83.3%-87.7%。同时,鹅源副粘病毒与鸡源新城疫病毒基因组结构在整体遗传进化上具有保守性。末端序列比较分析表明,鹅源副粘病毒基因组复制能力比鸡源新城疫病毒基因组复制能力强。进化地位分析表明NA-1株鹅源副粘病毒属于基因Ⅶ型,国家标准株F48E9属于基因Ⅸ型,传统弱毒疫苗株LaSota属于基因Ⅱ型。鹅源副粘病毒主要毒力基因-F基因分析表明,NA-1株属于强毒株,其112-117位氨基酸组成分别为112R-R-Q-K-R-F117。4株鹅源副粘病毒(NA-1、ZJ1、SF02、QY97)HN蛋白含有不同于8株鸡源新城疫病毒株(Aus/32、B1、Beaudette C、F48E9、Herts/33、LaSota、Ulster、HB92 V4)的特有氨基酸。提示鹅源副粘病毒可能含有不同于鸡源新城疫病毒的唾液酸受体结合位点。另外,鹅源副粘病毒株可能是在鸡源新城疫病毒株Herts/33基因组水平的基础上进化而来。分别以本人构建的pT-F和pT-HN克隆质粒为模板,PCR扩增NA-1株鹅源副粘病毒F基因和HN基因,并以由45个柔性氨基酸构成的柔性短肽作为Linker将F及HN基因片段体外连接,插入pCI-neo真核表达载体,构建NA-1株鹅源副粘病毒F基因和HN基因共表达载体

关 键 词： 鹅源副粘病毒 株 全基因组 序列分析 共表达

分 类 号： [S852.65]

领　　域： [农业科学] [农业科学] [农业科学]