导　　师： 何建国

学科专业： G1004

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 中山大学

摘　　要： 鱼类神经坏死病毒(viral nervous necrosis)分类上属于诺达病毒科(nodaviridae)β诺达病毒属(betanodaviruses),是多种养殖鱼类的重要病原.该文从患病毒性神经坏死病的斜带石斑鱼(epinephelus coioides)脑和眼中制备病毒液,感染ssn-1细胞系,用感染了病毒的细胞提取总rna做模板.并根据genbank数据库公布的同源序列设计了7对特异性引物,采用rt-pcr方法扩增出目的片断,将pcr产物测序和分析.斜带石斑鱼神经坏死病毒(orange-spotted nervous necrosis virus,ognnv)基因组由两个片断(rna1和rna2)组成,rna1由3103个核苷酸组成,含有一个开放阅读框(orf),编码982个氨基酸rna2由1433个核苷酸组成,含有一个orf,编码338个氨基酸.ognnv基因组与新加坡ggnnv(greasy grouper nnv)的基因组有高度的相似性.根据ognnv的rna2的orf核苷酸序列,设计了一对特异性引物,采用rt-pcr扩增了ognnv的主衣壳蛋白(mcp)基因.将分别经柱层析和sds-page纯化的融合蛋白作抗原,免疫新西兰兔制备了多克隆抗体.将受ognnv感染濒死鱼的脑和视网膜组织进行h&e染色后观察,发现脑组织和视网膜神经细胞坏死、细胞空泡化.地高辛核酸探针进行原位杂交,发现脑组织各个部分和视网膜神经细胞层可被标记.

关 键 词： 斜带石斑鱼神经坏死病毒 斜带石斑鱼 诺达病毒 原核表达 疫苗 抗血清

分 类 号： [Q78 S965.334]

领　　域： [生物学] [农业科学] [农业科学]