导　　师： 温硕洋;梁广文

学科专业： I0402

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 葫芦素b(cucurbitacin b)属于四环三萜类化合物，普遍存在于葫芦科植物及其它约100多种植物中，被认为是昆虫有效的取食抑制物。研究葫芦素b在苦瓜(momordica charantia linnaeus)中的时空分布情况，并检测三萜类化合物合成途径中的关键酶——鲨烯合成酶基因在苦瓜中的存在情况有利于在害虫防治更好地利用苦瓜中的葫芦素b。 本文以春秋两季的苦瓜植株作为研究对象，根据不同季节，苦瓜的不同生长时期，对苦瓜植株不同部位的葫芦素b进行详细测定，从而确定苦瓜植株中葫芦素b的时空分布情况。同时，尝试从苦瓜中扩增检测鲨烯合成酶基因，为探明苦瓜葫芦素b的生物合成途径做准备。主要的实验结果如下： 1.优化了葫芦素b的抽提方法，形成了简便易于操作的“氯仿甲醇抽提法”，使得最后的葫芦素b甲醇溶液杂质较少，有利用保护液相色谱柱和仪器其他主要部件。 2.确定了葫芦素b甲醇溶液在4℃条件下能在72小时内保持稳定。 3.通过对春秋两季的苦瓜植株进行不同时期不同部位的葫芦素b含量的检测，可以得出3点：(1)气候、营养等条件会影响苦瓜植株中葫芦素b的产生。在生长条件好的春季，苦瓜植株中不同部位的葫芦素b显著高于秋季种植的苦瓜植株中不同部位的葫芦素b的含量；(2)葫芦素b在春季种植的苦瓜植株中的时空分布规律与秋季种植的苦瓜植株中的时空分布规律相似。同样是：在苦瓜植株的生长时期中，果期的下部真叶的葫芦素b含量最高。并且苦瓜植株不同部位的葫芦素b的含量均是随着时间不断递增，到果期各部分的葫芦素b含量都达到最高峰；(3)虫害影响苦瓜果实中的葫芦素b的产生。变化规律是：开始受到虫害的时候，葫芦素b含量明显提高；当受害积累到一定程度后，葫芦素b含量变低。而不受虫害的苦瓜果实的葫芦素b的含量呈现随着时间不断递增的趋势。 4.根据8种植物鲨烯合成酶基因，设计了鲨烯合成酶基因的兼并引物，从苦瓜基因组dna中扩增目的片断，获得700-900bp的若干扩增片段，将这些片段克隆到测序载体中并进行测序，结果并没有获得与鲨烯合成酶基因相关的序列。

关 键 词： 苦瓜 葫芦素 四环三萜类化合物 害虫防治 植物抗虫性 合成酶 鲨烯合成酶 基因序列

分 类 号： [S433.1 S642.5]

领　　域： [农业科学] [农业科学] [农业科学] [农业科学]