导　　师： 陆海

学科专业： G1010

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 北京林业大学

摘　　要： 在环境胁迫的条件下,植物细胞中会有大量活性氧积累,若不能及时有效地清除积累的活性氧,则会对植物造成伤害。抗坏血酸过氧化物酶(APX)是植物体内抗坏血酸—谷胱甘肽循环(AsA-GSH)脱毒系统的一种重要的酶类,APX是含有血红素的蛋白质,可以清除植物体内的过氧化氢(H202),进而提高植物抵抗外界环境胁迫的能力。本文的研究主要以741毛白杨为实验材料,克隆得到两个APX基因,并将它们转入烟草植株中,分析研究了APX基因对植物抗盐和抗干旱胁迫的作用。主要研究内容和实验结果如下：1.因为毛白杨与毛果杨具有高度同源性,根据毛果杨基因序列,用电子克隆的方法,推断出两条毛果杨APX编码序列,再通过提取毛白杨RNA逆转录cDNA,以毛白杨cDNA为模板,依据推断的两个毛果杨APX序列设计引物,成功克隆出两个741毛白杨APX基因编码序列,分别命名为APX-Ⅰ和APX-Ⅱ。2.分别构建了APX-Ⅰ-PBI121和APX-Ⅱ-PBI121两个转基因表达载体,将转基因载体转化农杆菌LBA4404,用叶盘法侵染烟草,用100mg/L Kan来筛选转APX基因的烟草植株,通过southern杂交鉴定出成功转APX-Ⅰ和APX-Ⅱ基因的烟草各三个株系。3.对获得的转APX-Ⅰ和APX-Ⅱ基因的烟草进行抗盐胁迫和抗干旱胁迫实验。实验结果表明,与对照的非转基因烟草相比,转APX-Ⅰ和APX-Ⅱ基因的烟草具有更好的抗盐胁迫和抗干旱胁迫能力,所以分析认为抗坏血酸过氧化物酶(APX)很可能对提高烟草抗盐胁迫和抗干旱胁迫能力起着至关重要的作用。

关 键 词： 抗坏血酸过氧化物酶 克隆 转基因 抗盐 抗干旱

分 类 号： [Q7]

领　　域： [生物学]