导　　师： 白增亮

学科专业： G1008

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 山东大学

摘　　要： 端粒酶通过催化端粒合成,保持端粒长度,从而保证细胞的持续分裂能力,其活性与细胞永生化、肿瘤发生等过程密切相关.各种生物中端粒酶均至少由三个单位构成,即RNA模板TR、逆转录催化亚单位TERT和相关蛋白TLP等.人端粒酶逆转录催化亚单位HTERT的MRNA表达水平与端粒酶的活性有非常明显的一致性,表明HTERT的转录调控是端粒酶活性调节中的限速步骤.HTERT的启动子已经被克隆,其主要调节区为结构简单的看家基因类启动子:无典型的TATA-BOX结构,富含GC,具有多个SP1结合位点.近年来已经发现了很多参与HTERT转录调节的相关因子,其中对C-MYC的研究最为充分,SP1和雌激素也有所涉及.另外,P53、WT1、MZF-2和MAD是已知的对HTERT的转录起抑制作用的因子.但是,肿瘤细胞中HTERT基因表达的详细情形仍不明了.为了分离和克隆参与HTERT转录调控的转录因子,分析其调控的分子机制,并鉴定其对HELA细胞端粒酶活性的生物学效应,该研究进行了下列实验:1、参与端粒酶催化亚基HTERT转录调控的转录因子的分离和克隆.2、COUP-TFII融合蛋白的原核表达和纯化.3、COUP-TFII融合蛋白与HTERT基因启动子的相互作用.四、COUP-TFII在HELA细胞中对HTERT转录调控的影响.该研究表明,COUP-TFII作为一个转录抑制因子,通过与HTERT基因启动子相互作用,和C-MYC竞争结合E-BOX元件,降低人端粒酶催化亚基HTERT的转录并相应抑制HELA细胞端粒酶活性.初步揭示了COUP-TFII在细胞分化和肿瘤转化过程中的参与途径和调控机制,为开启以端粒酶为靶目标的肿瘤治疗奠定了基础.

关 键 词： 酵母单杂交 端粒酶 转录调控

分 类 号： [Q279]

领　　域： [生物学]