导　　师： 古练权

学科专业： G0303

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 中山大学

摘　　要： 该论文基于酪氨酸酶催化单酚发生的氧化-迈克尔加成反应机理,结合酪氨酸酶在水溶液、水不互溶有机溶剂和无溶剂三个体系的催化反应,做了以下的研究和应用:1.研究了酪氨酸酶催化羟基吡啶类化合物的氧化反应及生物学意义.结果表明,2-羟基吡啶、4-羟基吡啶不能被酪氨酸酶氧化,也不是酪氨酸酶的抑制剂.酪氨酸酶可以催化2,3-二羟基吡啶的氧化,氧化过程表现出单酚化合物的延迟期行为,说明羟基吡啶类化合物在反应条件下主要以酮式结构存在.2,3-二羟基吡啶氧化产物可以抑制乳酸脱氢酶活力,机理是氧化-迈克尔加成.2.在无溶剂体系中,酪氨酸酶可以快速催化对位取代苯酚和芳香胺的氧化-迈克尔加成反应.载体含量、水含量、酶含量和反应时间对反应速度有影响,其中水含量影响较大.对反应产物进行结构分析,4-苯氧基苯酚、4-苄基苯酚和4-苄氧基苯酚在酪氨酸酶和芳香胺作用下得到了相同的三取代胺的主产物3-1,4-苯基苯酚得到了两个吩嗪环主产物3-4和3-5.3.采用固定化酶在有机溶剂中催化了对位取代苯酚和芳香胺的反应,得到相同类型的三个胺取代产物4-1、4-2、4-3,取代基从醌环上脱落.基于该反应机理,设计了酪氨酸酶的三个前药模型化合物并进行了体外模型实验,即以酪氨酸酶的底物苯酚和邻氨基苯酚作为药物布洛芬和5-氟脲嘧啶的载体,经酪氨酸酶和亲核试剂的作用,实现药物的释放.结果表明,前药模型化合物4-5和4-8可以释放药物,化合物4-12还在研究中.4.对合成的化合物进行了乙酰胆碱酯酶的抑制活性测定,结果表明:3-4(IC<,50>=103.7 μM)和3-5(IC<,50>=20.6μM)具有较好的抑制活性;根据化合物3-4和3-5对乙酰胆碱酯酶的抑制动力学行为表明它们是竞争型抑制剂.5.在无溶剂下,研究了α-糜蛋白酶催化N-保护的氨基酸葡萄糖酯的合成,结果表明,底物比、加酶量、加水量、PH值和反应时间对反应有影响,其中加水量影响较大,反应产物正在研究中.

关 键 词： 酪氨酸酶 催化反应

分 类 号： [O629.8]

领　　域： [理学] [理学]