导　　师： 张利平;刘京生

学科专业： G1005

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 河北大学

摘　　要： 具有复杂多细胞行为和形态发生的粘细菌是高等的原核生物类群,可产生丰富次级代谢物.该实验以44株粘细菌发酵液粗提物为样品,筛选具有抗肿瘤作用的活性物质,并对其作用机制进行初步探讨.应用细胞毒实验方法,以体外培养的L1210、HELA肿瘤细胞、人胚肺成纤维细胞对44株粘细菌进行初筛,绝大部分菌株能够抑制肿瘤细胞的生长,对L1210抑瘤阳性率达88.6%,对HELA细胞的抑瘤阳性率是59%,BD105、YN65菌株对L1210、HELA肿瘤细胞的生长抑制作用较强,对人胚肺成纤维细胞的抑制作用较弱,故选用这两个菌株的发酵液抽提物作为体内抑瘤实验的样品.BD105、YN65菌株发酵抽提物对小鼠有一定的毒性,腹腔注射高浓度的稀释液(500ML发酵抽提物稀释液的25倍),可使小鼠中毒死亡.病理切片观察可看出,BD105对小鼠脏器的毒性主要表现在肺、肝、肾;YN65的毒性主要表现在肝.急性毒性实验结果表明,BD105的毒性高于YN65.在安全剂量内,BD105、YN65不但能够显著抑制小鼠移植性肝癌H22的细胞生长,而且能够延长荷瘤小鼠的生存期,并具有高效低毒的优势.透射电镜观察BD105、YN65低浓度实验组对小鼠肝癌H22体内肿瘤实体瘤组织超微结构,可见BD105和YN实验组均可见凋亡的细胞,且YN65样品能够使肿瘤细胞坏死.通过流式细胞术对其抑瘤作用进行了初步探讨,检测结果显示:BD105、YN65样品均能诱导小鼠肝癌H22实体瘤组织的细胞凋亡;BD105样品在高、低浓度条件下都不能够破坏DNA的合成,而YN65样品在低浓度下,影响DNA的合成.通过检测癌基因P53、BCL-2蛋白表达量,表明BD105、YN65样品的抑瘤作用不是通过P53诱导细胞凋亡,而是在低浓度剂量下,BCL-2基因蛋白产物的表达下调,促进了细胞的凋亡.

关 键 词： 粘细菌 抗癌活性 抑瘤率 生命延长率 细胞凋亡

领　　域： [生物学]