导　　师： 徐培林

学科专业： G1007

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 中山大学

摘　　要： 该实验室运用GENE SHUFFLING技术对鼠伤寒沙门氏杆菌(SALMONELLATYPHIMURIUM)和大肠杆菌(ESCHERICHIA COLI)的EPSPS酶基因(AROA)为模板,通过随机结合、交错延伸的PCR扩增,使AROA基因序列获得多位点突变而产生对草甘膦具有高抗性的突变基因AROAM1和AROAM12.AROAM1和AROAM12编码的EPSPS酶对草甘膦亲和力低而对PEP亲和力高.首先,该文分别构建了含有CAMV35S、TSP、EPSPS基因(AROAM1、AROAM12、ECAROA和STAROA)与NOS POLYA元件的植物双元表达载体(PTSM1、PTSM12、PTECAROA和PTSTAROA),通过农杆菌介导法转入烟草中,获得潮霉素抗性再生植株.该文构件了以草甘膦抗性基因AROAM12为筛选标记基因(置于T-DNA左侧),以BTSLM基因为目的基因(置于T-DNA右侧)的植物双元表达载体PGATBTSLM和PGTTBTSLM.以油菜和水稻分别作为双子叶植物和单子叶植物代表用农杆菌LBA4404介导进行遗传转化.在以上实验基础之上,该文建立了农杆菌介导油菜高效转化体的草甘膦筛选技术平台.同时建立了农杆菌介导水稻高效转化体系及其草甘膦筛选体系.该文应用了草甘膦筛选双子叶植物(油菜)和单子叶植物(水稻)遗传转化体,成功地获得抗虫和抗除草剂的植株.研究表明草甘膦应用于植物转化体筛选具有良好可行性与可靠性.相信草甘膦的研究具有良好的科学与商业价值.

关 键 词： 根癌农杆菌 转化体 草甘膦 草甘膦筛选 基因 基因 基因 油菜 水稻 转化率

分 类 号： [S126 S482.4]

领　　域： [农业科学] [农业科学] [农业科学]