导 师: 张鹤龄;莫日根
学科专业: G1001
授予学位: 硕士
作 者: ;
机构地区: 内蒙古大学
摘 要: 该文以黑曲霉中国株(3.758)总dna为模板,用不同浓度的dmso、甘油、甲酰胺对葡萄糖氧化酶(god)基因的pcr扩增的影响进行了实验.结果表明10﹪dmso对葡萄糖氧化酶基因的特异扩增有明显的促进作用.以黑曲霉中国株(3.758)总dna为模板,用la taqdna聚合酶进行pcr扩增获得1.8kb片段后,与pucm-t载体连接,转化大肠杆菌dh5α,获得阳性克隆,经鉴定所获得的重组质粒为含全长god基因的重组质粒命名为puctgo.并对所获得的god基因cdna进行序列测定、用rnadraw软件分析了克隆基因的二级结构、用dnassist version2.0软件分析了god基因的限制酶切图谱,最后将含有琥珀无义突变的位点通过pcr定点突变的方法将761处的a置换为g,使克隆到的基因成为编码完整酶蛋白亚基的功能葡萄糖氧化酶基因.
关 键 词: 黑曲霉葡萄糖氧化酶 基因克隆 序列分析 二级结构分析 限制性内切酶图谱分析
分 类 号: [Q783]
领 域: [生物学]