导　　师： 曾振灵

学科专业： I0601

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 本文首先对穿心莲粉体的质量评价做了一些工作，然后利用中药血清药物化学、中药药代动力学和中药血清药理学对其在鸡体内外的作用做了研究，最后对穿心莲有效单体的代谢也做了较为全面的探讨，为中药作用物质基础的研究提供了依据。主要结果如下： 1．激光粒度测试表明超微粉的d<,50>达到3.16μun，粒度分布均匀；大大提高中药有效成分的溶出量和溶出速率。超微颗粒快速释放有效成分和在肠道的吸附是其提高生物利用度及药效的前提。在一定的粒度范围内中药有效成分的溶出一致，主要与粉体颗粒的粒度有关，遵循扩散原理以顺浓度梯度释放。 2．以穿心莲内酯为指标来评价穿心莲超微化后，生物利用度得到了显著提高。以静注穿心莲内酯单体为参比制剂，测得鸡内服单体、d<,50>为3.16μm、30μun及50μm穿心莲粉的绝对生物利用度(％)分别是4.14±0.28、12.6±1.07、1.55±0.872和1.21±0.065。以内服穿心莲内酯单体为参比制剂，测得鸡内服d<,50>为3.16μm、30μm及50μm穿心莲粉的相对生物利用度(％)分别是305.6±27.8、37.7±2.56和29.57±1.98。 3．建立了鸡体内穿心莲内酯类成分的高效液相色谱分析方法。穿心莲超微粉有效成分穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯在鸡体内过程符合一级吸收二室模型。穿心莲内酯的主要药动学参数为：t<,max>51.5±3.5 min，c<,max>1.60±0.32μg/ml，t<,1/2β>104.8±12.8 min，auc329.3±28.8μg/ml·min。脱水穿心莲内酯的主要药动学参数为：t<,max>37.2±2.8 min，c<,max>1.44±0.088μg/ml，t<,1/2β> 143±12.8 min，auc 329.1±25.5μg/ml·min。 4．采用hplc-uv、hplc-dad、hplc-ms等现代分析技术建立了穿心莲超微粉的指纹图谱；鸡内服穿心莲超微粉后60min，发现9个入血成分，通过对体内穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、新穿心莲内酯和脱氧穿心莲内酯的定性分析，确定了这4个主要成分来源于穿心莲原药材。同时分析了这4个成分在鸡体内的经时过程，在10—60 min和90—480 min两时间段对其与sod活力升高率、n0的升高率和淋巴细胞增值率3个效应进行了相关分析，结果表明各成分与效应的单因素相关分析的r<'2>在0.807～0.996之间，多因素回归r<'2>在0.8707～0.9997之间，都有良好的相关性，基本与血清药物化学的研究思路吻合。 5．通过体内代谢性相互作用研究显示：对照组和实验组的咖啡因t<,1/2β>分别为632 min、415 min，表明两组的t<,1/2β>有显著性差异(p<0.05)，即穿心莲超微粉在本实验中对肝细胞色素氧化酶亚型cyp1a2有诱导作用。氨苯砜对照组和实验组的t<,1/2β>分别为55.4 min、48.4 min，对cyp3a4有诱导作用，但差异不明显(p>0.05)。对照组和实验组的奥美拉唑t<,1/2β>分别为16.5 min、 7.6 min，表明两组的消除半衰期差异极显著(p<0.01)；氯唑沙宗t<,1/2β>分别为26.3 min、20.5 min，两组差异显著(p<0.05)，即穿心莲超微粉在给鸡连续灌服后对肝细胞色素氧化酶亚型cyp2e1、cyp2c19有诱导作用。 6．利用hplc-dad、hplc-uv及hplc-ms 系统地研究了穿心莲内酯在鸡体内代谢，发现内服穿心莲内酯后，血液中出现一个代谢产物脱水穿心莲内酯，胆汁中有4个代谢产物，肠内容物中4个。静脉注射，血液和胆汁中均有8个代谢产物。代谢产物是穿心莲内酯的异构体或脱去一分子水的异构体，脱氧和脱水穿心莲内酯，14-去氧-11-氧化穿心莲内酯等。在粪便中发现4种代谢物；胆汁的代谢产物较多，说明它们可经胆汁排泄。与以往报道的相比，分子量相同的只有2个，所以鸡的代谢与大鼠、人种属差异大。 7．优化了原代肝细胞分离培养方法，首次利用鸡原代肝细胞对穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯进行体外代谢研究。对于穿心莲内酯而言，发现代谢产物脱氧和脱水穿心莲内酯、14-去氧-11-氧化穿心莲内酯，与鸡体内的代谢一致；脱水穿心莲内酯有两种代谢产物是其同分异构体。同时利用原代肝细胞的代谢研究穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯，显示消除特征与鸡体内的结果相似。 8．建立了体外鸡微粒体对穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的代谢研究方法，结果显示与贴壁细胞的代谢类似。 通过以上研究，使穿心莲及其有效单体在鸡体内外代谢的研究得到了补充，同时也为中药作用物质基础在畜禽体内外的研究提供了方法上的参考。

关 键 词： 穿心莲超微粉 鸡体内代谢 药代动力学 生物利用度

分 类 号： [S859.79]

领　　域： [农业科学] [农业科学] [农业科学]