导　　师： 胡桂兵

学科专业： I0201

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 柑橘是世界上最重要的水果之一，也是我国的主产水果。广东省作为我国南方重要的柑橘主产区，拥有许多优良的地方性良种，如沙糖橘、贡柑等，但成熟期过于集中，中熟品种比较多。本研究首先利用晚熟、单胚的‘清见’橘橙作为母本，6个广东主栽或有特色的优良柑橘品种为父本，进行了有性杂交工作，为获得优质晚熟品种、改善广东柑橘品种结构奠定初步的基础。然后，采用rapd分子标记技术，对进行有性杂交的7个亲本进行了亲缘关系分析，为今后杂交亲本组合选择提供一定的分子依据；同时，对通过有性杂交获得的671株不同组合的f<,1>个体进行了杂种早期鉴定研究，以便获得真正杂种，从而有利于后续工作的开展。最后，随机选取94株“‘清见’×台湾椪柑”真杂种进行了分子遗传图谱的构建研究，为柑橘的分子育种工作提供基础。主要研究结果如下： 1、有性杂交做了6个组合，一共获得f<,1>代苗671株，分别是：‘清见’×春甜橘收获饱满种子125粒，最后成苗78株；‘清见’×有籽沙糖橘收获饱满种子222粒，最后成苗63株；‘清见’×无籽沙糖橘收获饱满种子116粒，最后成苗90株；‘清见’×沙田柚收获饱满种子82粒，最后成苗58株；‘清见’×贡柑收获饱满种子306粒，最后成苗80株；‘清见’×台湾椪柑收获饱满种子382粒，最后成苗302株。 2、选用改良ctab小量法从柑橘幼嫩的叶片中提取基因组dna，得到了671株f<,1>个体基因组dna；使用正交试验设计，构建了一套完善的柑橘rapd分子标记分析体系，为进一步的研究工作提供了一个平台。 3、运用rapd分子标记技术，全面分析了杂交组合的7个亲本材料之间的亲缘关系。在rapd分析中，用129条随机引物扩增获得了475条谱带，利用ntsys软件绘制了7个亲本品种的亲缘关系树。由数据分析可知，与‘清见’亲缘关系最远的是沙田柚，实际相似系数为0.655；与‘清见’亲缘关系最近是春甜橘，实际相似系数为0.836。 4、运用rapd分子标记技术，对6个杂交组合获得的671株f<,1>个体进行了早期杂种鉴定，鉴定出647株真杂种。 5、在6组合之一“‘清见’×台湾椪柑”的301株真杂种中，随机选择其中的94个单株进行了分子遗传图谱的构建研究。通过使用1200个rapd引物对双亲进行多态性分析、小群体分析后，挑选其中80个引物进行分子遗传图谱的构建。这80个引物共产生119个多态性标记，其中父本41个，母本47个，共有位点31个。采用joinmap<'r>3.0作图软件进行连锁分析，得到了‘清见’(母本)和台湾椪柑(父本)的分子遗传图谱。其中母本‘清见’的分子遗传图谱具体数据为：30个分离位点形成7个连锁群，覆盖总图距328cm，位点之间平均距离为10.93cm，连锁群的平均长度为47cm，每个连锁群平均包含4.3个位点；父本台湾桠柑的分子遗传图谱具体数据为：23个位点形成(9+1)个连锁群，覆盖总图距317cm，位点之间的平均遗传距离为13.78cm，连锁群的平均长度为31.7cm，每个连锁群平均包含2.3个位点。

关 键 词： 柑橘 杂交育种 技术 分子标记 亲缘关系 分子遗传图谱

分 类 号： [S666 S603.6]

领　　域： [农业科学] [农业科学] [农业科学]