导　　师： 张志胜

学科专业： I0102

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 华南农业大学

摘　　要： 观赏风梨的观赏价值和经济价值很高，具有广阔的市场前景。多倍体育种是观赏植物育种和资源创新的重要方法。但目前国内外均未见到观赏凤梨多倍体育种的研究报道。本研究以vriesea‘christiane’、guzmania dissitisflora、g．‘claret’、g．‘continental’等为材料，以秋水仙素为诱变剂，对观赏凤梨成熟胚培养、茎尖组织培养及多倍体诱导和鉴定技术进行了研究，旨在建立观赏凤梨快速繁殖技术体系以及多倍体诱导和鉴定技术体系。主要研究结果如下： 1．观赏凤梨成熟胚在ms+6-ba 0.5 mg/l+naa 0.2 mg/l+10％cw上可直接萌发成苗。杂交组合不同，萌发率不同，最高和最低萌发率相差为76.50％，萌发率的高低与杂交组合亲缘关系远近无关。温度影响启始萌动时间和萌动高峰期，25℃下种胚起始萌动时间和萌动高峰期均最早。6～8μmol·m<'-2>s<'-1>有利于成熟胚的萌发。种子在4℃下贮藏时间越长，种胚萌发率越低。 2．属间杂种v.‘christiane’×g．dissitisflora胚在ms+6-ba 2.0 mg/l+naa 0.5 mg/l+2，4．d 0.5 mg/l+10％cw上培养形成愈伤组织。不同胚愈伤组织增殖率显著不同，培养50 d，最高绝对增殖倍数为20.43，最低为7.71。含6-ba 2 mg/l，naa 0.2～1 mg/l的ms培养基不能促进愈伤组织的增殖。培养基对愈伤组织平均芽分化数有显著影响，在含有6-ba 2 mg/l+naa 0.5 mg/l的ms培养基上，平均芽分化数最高，为18.39个/块。基因型对芽分化率和平均芽分化数显著不影响。分化出的芽苗在含有naa 0.5 mg/l+iba 0.5 mg/l+6-ba 0.25 mg/l的1/2ms培养基中诱导生根效果最好，生根率为99％，平均根数为2.4条/株。 3．品种对短缩茎切块污染率、褐变率的影响显著。激素的种类和浓度对起始芽分化的时间、丛生芽诱导率和平均芽分化数有明显影响，在1/2ms+naa 0.2mg/l+6-ba 2 mg/l上，起始芽分化的时间是48 d，平均芽分化数是6个，诱导率为40％，诱导效果最好。不同品种的芽诱导率不同。6-ba浓度对丛生芽增殖的影响显著，在0～4 mg/l范围内，6-ba浓度越高，增殖倍数越大。naa浓度对丛生芽增殖有显著影响，naa浓度为0.2 mg/l时，增殖倍数显著高于对照，而当浓度为1 mg/l，增殖倍数显著低于对照。培养基中同时添加6-ba和naa，比单独添加6-ba和naa的增殖效果好，当6-ba浓度为3 mg/l，naa浓度为0.5 mg/l时，g.dissitisflora和g．‘claret’增殖倍数最大，分别为5.24和3.84。品种对丛生芽增殖的影响显著，在相同的培养基上，g.dissitisflora增殖倍数显著高于g.‘claret’。 4．秋水仙素溶液浸泡丛生芽能有效诱导出多倍体。同一秋水仙素浓度下，处理时间越长，多倍体诱导率越高。在短时间处理下，秋水仙素浓度高，多倍体诱导率也高。用0.1％秋水仙素处理g．‘ciaret’和g.‘continental’丛生芽3 d，多倍体诱导率最高，分别为34.29％和30.00％。 5．秋水仙素浓度、处理时间以及其互作对处理当代愈伤组织的死亡率和绝对增殖倍数的影响均显著，秋水仙素浓度和处理时间与死亡率呈显著正相关，与其绝对增埴倍数呈显著负相关。秋水仙素浓度对第二代愈伤组织的死亡率和绝对增殖倍数的影响显著。秋水仙素处理愈伤组织没有诱导出多倍体植株。 6．采用改良压片法，能准确鉴定观赏凤梨二倍体和多倍体，也能准确鉴定染色体数，染色体鉴定的结果与形态学鉴定的结果基本一致。与观赏凤梨二倍体植株相比，四倍体或四、八混倍体植株矮化，粗壮，叶片宽而厚，叶面粗糙，颜色也较深。 通过上述研究，建立了观赏凤梨快速繁殖技术体系及多倍体诱导和鉴定技术体系，为进一步开展观赏凤梨染色体工程育种奠定了坚实的基础。

关 键 词： 观赏凤梨 组织培养 秋水仙素 多倍体诱导 快速繁殖技术

分 类 号： [S668.3 Q943]

领　　域： [农业科学] [农业科学] [生物学]