导　　师： 王金忠

学科专业： G1005

授予学位： 硕士

作　　者： ;

机构地区： 南开大学

摘　　要： 干扰素与宿主的抗病毒防御反应、细胞生长和免疫调节密切相关。干扰素的合成与功能受干扰素调节因子(interferon regulator factors，irfs)的调节，其中irf-7是irfs超家族中的重要一员，是诱导产生i型干扰素的关键性调节因子。病毒感染细胞后，irf-7将被磷酸化并进入细胞核，启动下游靶基因的转录，发挥抗病毒效应。irf-7还可直接作用于病毒启动子，抑制病毒的激活。 irf-7的稳定性和活性受蛋白质翻译后修饰调节。研究发现，irf-7可以被泛素化和乙酰化修饰，而这些修饰通常发生在靶蛋白的赖氨酸位点上，我们推测赖氨酸突变将对irf-7的稳定性和活性产生重要的影响。我们用定点突变的方法将irf-7中不同位置上的赖氨酸残基分别突变为精氨酸，并将野生型和突变型irf-7表达质粒分别转进人胚肾细胞系293t中，检测突变对irf-7稳定性和活性的影响。发现与野生型相比突变体k179r、k296r、k444r、k446r、k452r稳定性提高，而突变体k209r的稳定性降低，突变体k45r和k341r与野生型相比稳定性没有明显变化。 赖氨酸突变影响irf-7的抗病毒活性。irf-7可以抑制人8型疱疹病毒(hhv-8)激活蛋白rta对orf57(hhv-8第57个开放读码框)的激活。将野生型或突变型irf-7表达质粒、rta表达质粒和orf57启动子控制的报道质粒共转染293t。细胞，检测报道基因的表达水平。发现与野生型irf-7相比，irf-7k452r．对rta激活的抑制作用增强，k45r、k209r、k341r、k444r和k446r．对rta的抑制作用减弱，k179r和k296r的抑制能力与野生型相比没有明显差异。 赖氨酸突变影响irf-7激活干扰素基因表达的能力。将野生型和突变型irf-7与干扰素启动子控制的报道质粒共同转染293t细胞并比较激活效果。与野生型irf-7相比，irf-7 k209r激活干扰素启动子的能力增强，k179r、k296r、k341r、k444r、k446r、k452r激活干扰素启动�

关 键 词： 赖氨酸 残基突变 干扰素调节因子 免疫调节 抗病毒效应

领　　域： [生物学] [生物学]