导　　师： 谭北平

学科专业： I0801

授予学位： 博士

作　　者： ;

机构地区： 中国海洋大学

摘　　要： 本文比较研究了低鱼粉饲料中添加微胶囊蛋氨酸或晶体蛋氨酸对军曹鱼和凡纳滨对虾生长性能的影响，揭示军曹鱼和凡纳滨对虾在摄食低鱼粉饲料的条件下对不同形式的蛋氨酸的利用效果。实验内容主要分为三部分：1)微胶囊蛋氨酸制备技术相关工艺参数的筛选及性能检测；2)微胶囊或晶体蛋氨酸在军曹鱼低鱼粉饲料中应用效果；3)微胶囊或晶体蛋氨酸在凡纳滨对虾低鱼粉饲料中的应用效果。实验结果如下： 1)应用化学复相乳化法和物理流化床法对蛋氨酸进行微胶囊工艺参数的筛选和制备。经均匀设计实验表明，复相乳化法制备的明胶微胶囊蛋氨酸粒径较大，最高载药量为46.94％；流化床法中以邻苯二甲酸醋酸纤维素(cap)、棕榈酸三酰甘油酯(tpa)和丙烯酸树脂(res)为主要壁材，分别进行微胶囊蛋氨酸的制备，通过对进出风温度、蠕动泵流速、包被时间和雾化压力等指标的调整控制，得出载药量在60-70％之间、颗粒大小均匀、外表光滑的微胶囊产品。 以载药量为依据，选取流化床法制备的微胶囊进行产品溶失性能的评估。配制五组等氮等能饲料，蛋氨酸的添加形式分别为：晶体蛋氨酸(met)、羟基蛋氨酸(mha)、邻苯二甲酸醋酸纤维素微胶囊蛋氨酸(cap)、树脂微胶囊蛋氨酸(res)和棕榈酸甘油酯微胶囊蛋氨酸(tpa)。将各处理的饲料投入海水后，分别于10min、20min、30min、60min及90min测定饲料蛋氨酸的溶失率和海水ph值的变化。结果表明，饲料中蛋氨酸的溶失率随着浸泡时间的延长呈上升趋势，res组的溶失率显著低于met组，海水ph值随着浸泡时间的增加呈下降趋势，cap和res组下降缓慢，蛋氨酸溶失率与海水ph值直接呈明显的负相关。上述研究表明，res微胶囊蛋氨酸能够有效减缓蛋氨酸的溶失。 2)将鱼粉组和低鱼粉后蛋氨酸缺乏组分别设为正、负对照组，试验组饲料在负对照组的基础上分别添加晶体蛋氨酸(met)、羟基蛋氨酸(mha)、邻苯二甲酸醋酸纤维素微胶囊蛋氨酸(cap)、丙烯酸树脂微胶囊蛋氨酸(res)和棕榈酸甘油酯微胶囊蛋氨酸(tpa)，共七组等氮等能饲料，比较研究军曹鱼幼鱼对微胶囊蛋氨酸和晶体蛋氨酸的利用效率。每个处理设三个重复，每个重复放养20尾鱼(初重5.40±0.07g)，流水养殖8周，水温为29-31℃。结果表明res组的增重率和特定生长率在各蛋氨酸添加组中最高，分别显著高出负对照组23.64％和7.99％(p＜0.05)，met组蛋白质效率显著高于负对照组和其他几个蛋氨酸组，而饲料系数显著低于其他组(p＜0.05)。蛋氨酸组的肥满度和正对照组相比差异不显著(p＞0.05)；微胶囊蛋氨酸和晶体蛋氨酸组的肌肉粗蛋白含量以及蛋氨酸与必需氨基酸(a/e)的比值与正对照组相比差异不显著(p＞0.05)；微胶囊蛋氨酸组的军曹鱼肠道胰蛋白酶活性显著高于正对照组和met组(p＜0.05)，res组胃蛋白酶和正对照无显著差异，但是显著高于其他组(p＜0.05)；met组军曹鱼幼鱼摄食后0.5h肠道na+，k+-atp酶活性显著高于其他各组(p＜0.05)，摄食3h后正对照组和res组na+，k+-atp酶活性上升显著高于cap和mha组(p＜0.05)；摄食8h后正对照组和微胶囊蛋氨酸组显著高于mha和met组(p＜0.05)。 为进一步验证军曹鱼幼鱼对蛋氨酸的吸收速度，探讨晶体蛋氨酸、res微胶囊蛋氨酸和蛋白结合态氨基酸(鱼粉对照组)在吸收上的差异，设置日投饲频率分别为2(0800和1600 hours)、3(0800，1200和1600 hours)、4(0800，1100，1400和1600 hours)和5次(0800，1000，1200，1400和1600 hours)的处理组，其中鱼粉组只投喂2次，每个处理设三个重复，每个重复放养20尾鱼(初重5.40±0.07 g)，流水养殖4周，水温为29-31℃。结果表明，随投喂次数的增加各试验组增重率有增加的趋势，投喂5次的res组增重率显著高于其他组(p＜0.05)，投喂3次以上各组和投喂2次的res组的肥满度与对照组差异不显著(p＞0.05)；投喂3次的met组肝脏总蛋白酶活性显著高于其他各组(p＜0.05)，投喂3次的res组肠道淀粉酶活性显著高于其他各组，投喂2次和5次时，met组胃蛋白酶活性显著高于res组(p＜0.05)，随投喂次数的增加met组的got/gpt显著升高，投喂4次的res组got/gpt显著高于其它各处理(p＜0.05)。 3)设置五组低鱼粉蛋氨酸缺乏的等氮等能饲料，分别添加晶体蛋氨酸(met)、羟基蛋氨酸(mha)、邻苯二甲酸醋酸纤维素微胶囊蛋氨酸(cap)、树脂微胶囊蛋氨酸(res)和棕榈酸甘油酯微胶囊蛋氨酸(tpa)，饲喂凡纳滨对虾养殖7周，测定其在养殖第28d和50d时的生长性能，饲料利用率以及第14、28和50d时的消化酶活性。五个处理各设三个重复，每个重复放养40尾虾(初重0.81±0.01g)。溶失率实验表明res能够更有效的减缓饲料中晶体蛋氨酸的溶出。第28d时，met组的饲料系数显著低于cap组和mha组，而增重率、蛋白质效率(per)和特定生长率(sgr)则显著高于cap组和mha组(p＜0.05)。met数值上高出res组；第50d时，met和res的增重率显著高于其他组(p＜0.05)，res组的增重率、per和sgr分别高出met组3.56％、8.63％和2.19％，但无显著差异(p＞0.05)，res组的fcr显著低于其余各组(p＜0.05)；试验第28d和50d时，res组全虾粗蛋白含量显著高于met组(p＜0.05)，res组50d时的对虾肌肉蛋氨酸含量显著高于met组(p＜0.05)；第28d时，摄食后0.5h时cap组的肝胰腺mat活性最高，tpa组在0.5h和1h时保持较低水平，3h时开始上升，met组在0.5h、3h和6h时mat活性均较低但是在12h时骤然升高，第50d时，摄食1h时三个微胶囊组的mnt活性与0.5h相比有所上升，res组上升较缓慢而met组下降，3h时res组mat活力达最大；与第28d相比第50d时总蛋白酶活力均有所回升，tpa组显著高于res组(p＜0.05)，met组脂肪酶活力均显著高于其它处理组(p＜0.05)，淀粉酶活力在数值上均低于微胶囊组(p＜0.05)；第28d时，met组的凡纳滨对虾对饲料蛋白质的表观消化率显著高出其它各组(p＜0.05)，在第50d时低于res组，但是差异不显著(p＞0.05)，在第28d和50d时res组粗脂肪的消化率显著高于met组(p＜0.05)。 为进一步验证凡纳滨对虾对蛋氨酸的吸收速度，探讨晶体蛋氨酸、res微胶囊蛋氨酸和蛋白结合态氨基酸在吸收上的差异，设置日投饲频率分别为2(0700和2100 hours)，4(0700，1200，1800和2100 hours)，和6次(0700，0930，1200，1500，1800和2100 hours)的实验，其中正对照组(鱼粉组)和负对照组(蛋氨酸缺乏)只投喂4次。每个处理设三个重复，每个重复放养30尾虾(初重1.27±0.01 g)，养殖5周，水温为29-30℃。结果表明，投喂次数相同时，res组增重率、特定生长率和蛋白质效率比在数值上均高于met组，摄食率和饲料系数则均低于met组，但是未见显著性差异(p＞0.05)；res组在投喂6次时增重率和正对照组差异不显著(p＞0.05)；res组在投喂4次时总蛋白酶活性达最高，与正对照组差异不显著(p＞0.05)。 综上所述，添加蛋氨酸有助于改善军曹鱼幼鱼和凡纳滨对虾对饲料中豆粕和肉骨粉的利用率，促进生长。以增重率为参考指标，显示军曹鱼幼鱼和凡纳滨对虾在短期的养殖试验中均能够利用晶体蛋氨酸用于生长，而蛋白质代谢酶指标则显示res微胶囊在降低溶失率的同时在消化道内有较好的缓释作用，可以提高蛋氨酸的利用率，促进蛋白质的合成。今后研究中，有必要进一步改善res微胶囊工艺，选择适宜的鱼粉和其它蛋白源的替代比例以满足动物最大生长。

关 键 词： 低鱼粉饲料 微胶囊蛋氨酸 晶体蛋氨酸 军曹鱼 对虾 生长性能 蛋白质合成

分 类 号： [S965.3 S963.161]

领　　域： [农业科学] [农业科学] [农业科学] [农业科学]