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乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

作  者: ; ; ; ; ;

机构地区: 广西大学生命科学与技术学院发酵与酶工程研究所

出  处: 《中国生物学文摘》 2007年第4期30-30,共1页

摘  要: 与其它微生物相比,用大肠杆菌进行发酵生产乳酸有许多优势,但大肠杆菌没有L.乳酸脱氢酶基因,不能利用糖发酵生L.乳酸。本文采用PCR技术,以乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)基因组DNA为模板,克隆得到L-乳酸脱氢酶(L-lactatedehydrogenase)基因,将该基因的ORF连接到表达质粒pET-22b(+),获得重组质粒pET—1dhL.将pET—1dhL质粒转化大肠杆菌BL21株,实现了1dhL基因的表达;对含有1dhL基凼的重组菌株进行表达研究,在30℃以IPTG诱导8h后,SDS.PAGE分析可见明显特异性条带,酶活力达到6.49u/mL,足野生菌酶活力(2.82u/mL)的2.3倍,对重组表达的L-乳酸脱氢酶生物学特性研究显示,它们的最适反应温度为27.30℃,最适反应pH为5.0,5.3。

关 键 词: 乳酸 乳酸脱氢酶 乳酸片球菌 克隆 表达

领  域: [生物学]

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