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文献详细Journal detailed

抗链霉素杂交瘤细胞株的建立与竞争ELISA试剂盒的研制
Filtration of hybridoma lines and development of rapid test competitive ELISA kit for streptomycin

作  者: ; ; ; ; ; ; ;

机构地区: 西北农林科技大学动物科技学院

出  处: 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 2007年第4期46-50,共5页

摘  要: 制备牛血清白蛋白-链霉素(SM-BSA)免疫Balb/c小鼠,用细胞融合技术制备抗链霉索单克隆抗体(SM mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备SM mAb。依据竞争ELISA原理,应用SM mAb研制SM快速ELISA检测试剂盒(SM-Kit),并对其灵敏度、准确度、特异性、基质效应性等进行检测。结果表明,SM-Kit标准曲线呈典型的S型,线性检测范围为1~128μg/L,相关系数R2=0.925 1,灵敏度为0.45μg/L,半数抑制浓度(IC50)为7.76μg/L,检测限为1μg/L;奶样、猪尿样的平均添加回收率分别为104.45%和84.1%;SM-Kit与双氢链霉素的交叉反应率(CR)为104.16%,与其他抗生素类药物的CR<0.001%;基质对SM-Kit的检测结果影响不大。可见SM-Kit具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于SM残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。 Balb/C mice were immunized with streptomycin-bovine serum albumin and hybridoma lines that secrete monoclonal antibody against streptomycin(SM mAb) were filtered with cell fusion. A competitive ELISA test kit for detection streptomycin(SM-Kit)was developed with anti-SM monoclonal antibody (SM mAb) and its sensitivity, veracity, specificity and stability were tested respectively. The calibration curve of the SM-Kit with standard SM competitor was typical sigmoid curve with the linear detection of 1.0 to 128.0 μg/L(R^2 =0. 925 1) ,the sensitivity of 0.45μg/L,the IC50 of 7.76 μg/L and the detection limit of 0.45μg/L. The recoveries of SM spiked in milk,pig urine were 104.45%,84.1% respectively. The SM-Kit had 104.16% cross-reactivity towards dihydrostreptomycin and little or no cross-reactivity towards other antibiotics. The SM-Kit possessed rapidity, sensitivity, specificity and briefness and was proved to be used in the rapid test of SM residues in animal food.

关 键 词: 链霉素 单克隆抗体 细胞融合 竞争 快速检测试剂盒

领  域: [农业科学] [农业科学] [农业科学]

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相关机构对象

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