作　　者： ; (王增禄）;

机构地区： 第四军医大学

出　　处： 《药物生物技术》 1996年第4期197-201,共5页

摘　　要： 本文结合胰脏多酶联产实验对胰蛋白酶抑制剂进行了探讨。制备了Ｔｒｙｐｓｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱，采用硫酸铵、三氯醋酸沉淀、离心、色谱、冷冻干燥等技术，对猪胰脏中胰蛋白酶抑制剂进行分离纯化，测定各步中的活性，对有活性的终产品进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定分析。亲和柱偶联率为９５．７６％，亲和率为９．５６ｍｇ蛋白／ｍｌ胶。从０．７Ｓ（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀溶解液中亲和吸附胰蛋白酶后液体中与从０．９Ｓ（ＮＨ４）２ＳＯ４上清中亲和吸附的胰蛋白酶抑制剂的色谱图同一般亲和色谱图，呈单一峰。而从０．９Ｓ（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀及三氯醋酸沉淀吸附胰蛋白酶后液体中吸附胰蛋白酶抑制剂的色谱图均有一小一大两个峰。吸附物解吸后经活性测定，仅０．９Ｓ沉淀上清液中有较高活性，而０．７Ｓ沉淀中活性低且不稳定，其余两种吸附物均无活性。各原液中未测到活性。用１ｋｇ胰脏制得１５ｍｇ胰蛋白酶抑制剂，酶比活为２０８９Ｔ．Ｉ．Ｕ／ｍｇ蛋白。该产品的电泳图谱显示，在电泳前沿和分子量为２０ＫＤ处同时有两条带。第一条带应为胰蛋白酶抑制剂。

关 键 词： 猪 胰脏 抑制剂 胰蛋白酶 亲和层析柱

领　　域： [化学工程] [生物学]