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LDL受体基因cDNA的RT-PCR分离、克隆及其在RFLP中的应用
Cloning of LDL receptor Gene cDNA by RT-PCR and the Application of the cDNA Probe for RFLP

作  者: ; ; ; ; ;

机构地区: 暨南大学

出  处: 《生物化学杂志》 1996年第5期535-539,共5页

摘  要: 利用RT-PCR技术分离低密度脂蛋白受体基因cDNA,将长为2605bp的cDNA插入质粒pJN6,并经全序列测定证实,该序列与已报道序列相比,存在两个变异碱基,即第754位C→T,和1654位的G→A,这两个变异碱基并不改变编码的氨基酸,利用LDL受体基因cDNA中的ClaⅠ片段作为探针,检测到LDL受体基因上外显子8的StuⅠ位点是个限制性片段长度多态性位点。所克隆的cDNA含有可译框架的全部密码,因此可作为基因表达材料。 A cDNA containing the entire coding region for LDL receptor was obtained by reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR). The cDNA was inserted into vector pJN6. Two differences in nucleotides were found as compared with the sequences already published. One of the differences occurs at nucleotide number 754 where T replaces C. Another difference occurs at nucleotide number 1654 where A replaces G. Both substitutions do not change their amino acid codes. In order to further study the application of the cDNA as probe for RFLP at the LDL receptor locus,the probe was prepared from the recombinant plasmid and then hybridized to total genomic DNA digested with Stu I. The test confirmed that Stu I in exon 8 was a polymorphic site.

关 键 词: 低密度脂蛋白 受体基因

领  域: [生物学]

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