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水稻白叶枯病菌dsp基因的克隆、同源性和功能分析
Cloning, Homologyy and Function Analysis of dsp gene of Xannthomonas oryzae pv. oryaae

作  者: ; ; ;

机构地区: 南京农业大学植物保护学院植物病理学系

出  处: 《农业生物技术学报》 1995年第3期65-70,共6页

摘  要: 以经转座子Tn5诱变的水稻白叶枯病菌dsp基因突变体XooM3l04为材料,构建了dsp基因探针质粒pVIR3。采用分子杂交法,从基因文库克隆中筛选出1个dsp基因克隆pNAX3111,含22kb的外源DNA插入片段,具有4个KpnI酶切位点,其中3.0,2.0kb两个片段与探针质粒中Tn5侧翼的dsp基因序列同源。以pNAX3lll为探针与Xoo日本系统、中国系统及菲律宾系统的菌株,细菌性条斑病菌和菊欧氏杆菌菌株基因组DNA及JXOⅢhrp基因克隆pNAX3l03进行同源性分析,结果表明,除与pNAX3l03和JXOⅢ基因组DNA有同源性外,与其它所有试验菌株均无同源杂交带出现。功能互补分析表明,pNAX3lll能恢复dsp基因突变体XooM3l04的淀粉酶活性和对水稻的致病性。 A dsp gene probe(pVⅠ R3)including DNA fragment of Tn5 and dsp flankinng sequencesfrom a Tn5一induced rnutant(XooM3l04)of Xanthomnas oryzae pv,oryzae JXOⅢwas constructed.Onedsp gene clone(pNAX3lll)was obtained by screening the genomic library of JXOⅢwith α-32-P-dCTP la-belling pVIR 3 in colony hybridization experiment.pNAX3lll carries 22 kb DNA inserts in which fourKpnl restruction sites were located and two DNA fragmants(2. 0 kb and 3.0 kb)was homolog ous withpVIR3 in southern blot analysis. No homological sequences could be found in all of the tested strains ofXoo races except JXOⅢ, and also in X.oryzae pv. oryzicola, Erwinia chrysanthemi,but the high homol-ogy existed between hrp genes and dsp genes of JXOⅢ.When pNAX3lll was transfered into a dsp genemutant(XooM3l 04),the pathogenlcity to rice and amylase activity of transconjugants was restored assame phnotynes as JxOⅢ.

关 键 词: 水稻 白叶枯病菌 同源性分析

领  域: [农业科学]

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