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溶藻弧菌01株外膜蛋白的分离及其抗原性分析

作  者: ; ; ; (段翠兰); (陈辉);

机构地区: 江苏省水产养殖病害防治中心江苏南京210036

出  处: 《水产学报》 2004年第B12期112-116,共5页

摘  要: 用两种方法从溶藻弧菌01株中提取外膜蛋白,用丙酮沉淀法提取的外膜蛋白,经SDS-PAGE电泳,凝胶用考马斯亮蓝G-250染色后,图谱显示一条主区带及十多条次要区带,其中八条主要蛋白质带的分子量分别为61.8、57.2、47.8、39.3、35.6、33.3、26.4和24.4kD。采用十二烷酰基肌氨酸钠法提取的外膜蛋白经SDS—PAGE电泳,图谱显示一条主区带及三条次要区带,而且主区带的蛋白浓度很高,分子量为35.6kD,其它三条蛋白带的分子量分别为47.8、43.1kD和39.3kD。用Western blot印迹结果显示出分子量约为35.6kD外膜蛋白与兔抗溶藻弧菌血清发生了免疫反应,同时还有两条微弱的显色带,其分子量分别为39.3和47.8kD,表明35.6kD外膜蛋白具有较强的免疫原性,能刺激机体产生免疫应答。实验又进一步将外膜蛋白腹腔接种紫红笛鲷后用4.8×108CFU·mL-1溶藻弧菌活菌腹腔攻毒,30d后,相对免疫保护率达到62.5%。研究结果表明分子量35.6kD的外膜蛋白是溶藻弧菌01株的主要外膜蛋白,具有较强的免疫原性和反应性,为保护性抗原。

关 键 词: 溶藻弧菌 外膜蛋白 免疫印迹 免疫应答 紫红笛鲷

领  域: [农业科学] [农业科学]

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