作　　者： ; ; ; ; ; (徐旭东）;

机构地区： 北京大学生命科学学院

出　　处： 《生物工程进展》 1994年第6期39-42,共4页

摘　　要： 生物工程技术在工业、农业和环境保护上的应用日益广泛，将工程微生物应用于环境污染的治理，是一条快速、安全又经济的途径。本文报道了获得一种清除重金属污染工程藻的研究。将小鼠金属硫蛋白－Ｉ（ｍｏｕｓｅｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ－Ｉ，ｍＭＴ－Ｉ）ｃＤＮＡ基因片段插入到质粒ｐＲＬ４３９上的强启动子ＰｐｓｂＡ之后，并与穿梭载体ｐＤＣ－８相连构建成功大肠杆菌──蓝藻穿梭表达载体ｐＤＣ－ＭＴ，然后通过三亲结合转移法将ｐＤＣ－ＭＴ转入固氮丝状体蓝藻鱼腥藻（Ａｎａｂａｅｎａ）７１２０中，经新霉素筛选获遗传稳定的转外源ＤＮＡ藻株；纯化单藻落扩大培养后，提取蓝藻质粒，斑点杂交确定ｍＭＴ－ＩｃＤＮＡ的转人；在培养基中加入重金属Ｃｄ，培养后收集藻细胞，用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ，极谱法和原子吸收等多种方法确定金属硫蛋白的表达，并计算表达量约为４０μｇＭＴ／ｇ藻鲜重。

关 键 词： 金属硫蛋白 蓝藻 角腥藻 表达 基因克隆

领　　域： [生物学] [环境科学与工程]