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细菌脂多糖中GDP-colitose糖合成基因的预测、克隆及表达鉴定
IDENTIFICATION、CLONING ANDEXPRESSION OF GDP-COLITOSE SYNTHESISIN BACTERIAL LIPOPOLYSACCHARIDE

作  者: ; ; ; ; ;

机构地区: 南开大学生命科学学院

出  处: 《南开大学学报(自然科学版)》 2004年第2期1-6,共6页

摘  要: colitose糖存在Salmonella enterica O50、S.enterica O35、E.coli O111、E.coli O55和Vibrio choleraeO139等少数几种细菌的O-抗原中.GDP-colitose糖的合成酶基因分别为wbdJ、wbdK和gmd.用PCR的方法扩增出三种基因的片断,克隆到表达载体pCAL-c中,从而构建了表达质粒pLW1、pLW4、pLW7,转化到大肠杆菌BL21-Gold中,获得工程菌株B10,B11,B12.IPTG诱导表达,纯化得到三种电泳纯的表达产物,分子量分别约为35kD,44kD,42kD,与预测结果相似. Colitose is present in the O antigen of Salmonella enterica O50、S. enterica O35、E. coli O111、E. coli O55 and Vibrio cholerae O139. Comparision of the O antigen gene clusters of these strains indicated putative GDP-colitose biosynthetic genes and the putative biosynthetic pathway. We cloned and expressed these genes in BL21-Gold and purified the expression products. Molecular weight of Gmd, WbdJ, WbdK is 42kD, 35kD, 44kD respectively.

关 键 词: 生物信息学 克隆 表达

领  域: [生物学]

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